如何通過過濾手段有效延長高效液相色譜系統(tǒng)的使用壽命 

高效液相色譜分法（HPLC），是在經(jīng)典液相色譜法基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種分析方法。因其樣品分析速度快，故稱高效液相色譜。目前，已在生物、醫(yī)學、有機化學、食品與飲料、環(huán)境監(jiān)測等諸多領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。
       高效液相色譜分析儀一般由進樣器、脫氣機、泵、色譜柱、柱溫箱、檢測器等組件構(gòu)成，如圖1所示。其原理是：待檢測物隨流動相被注入色譜柱，因不同類型待檢物與固定相的相互作用力不同而在色譜柱內(nèi)得到分離，最后通過檢測器得到不同的峰信號。 

  高效液相色譜分析儀為一個精密且昂貴的分析系統(tǒng)，如何規(guī)范操作、合理維護從而使各組件達到最大壽命便顯得尤為重要。這里筆者推薦微孔過濾，來延長各組件的使用壽命。
（1）流動相的過濾
       流動相作為待檢物質(zhì)的載體，會依次通過脫氣機、高壓輸液泵、進樣器、色譜柱，最后進入檢測器。流動相的質(zhì)量會直接影響相關(guān)組件的使用壽命。流動相若不進行過濾，其內(nèi)部的顆粒便會進入系統(tǒng)，造成小孔管道、色譜柱、高壓輸液泵的堵塞或損傷。
       安諾過濾建議流動相在使用前用0.45μm或0.22μm孔徑的Φ47mm濾膜匹配玻璃過濾器進行過濾。也可以使用相同孔徑的Φ33mm針頭式濾器進行過濾。流動相過濾除了可以去除細小顆粒外，同時還可以去除小氣泡，減輕脫氣機的負擔，減少分析過程中的波動。
（2）樣品進樣前過濾處理
       高效液相色譜的待檢測樣品品種繁多，不同樣品顆粒含量和粒徑分布也差別極大。若未經(jīng)過濾直接進樣，短時間內(nèi)就會導(dǎo)致色譜柱的堵塞，造成柱壓增高、使用壽命大幅下降，見圖2。
       因此，在進樣前安諾推薦用0.45μm或0.22μm孔徑的針頭式濾器對樣品進行過濾處理。一般可根據(jù)待處理樣品的體積，選擇合適規(guī)格的針頭濾器進行處理。Φ5mm過濾量最小（<1ml），滯留體積也最?。?lt;15μl）；Φ13mm過濾量比前者要大一些(<10ml)；Φ25mm過濾量最大（<80ml）。針對顆粒負載大的難過濾樣品，可以選擇含有玻纖或PP預(yù)過濾層的針頭式濾器處理。 

 

 按照上述建議對流動相和待檢樣品進行過濾，可極大程度地保證高效液相色譜的使用壽命。

       過濾注意事項：
（1）請根據(jù)化學兼容性表，選擇合適的濾膜。
（2）請注意濾膜親疏水性。例如，疏水PTFE由于其自身的強疏水性，建議過濾有機溶劑但不推薦過濾水性溶液。
（3）由于過濾器或濾膜本身可能會出現(xiàn)UV吸收的干擾性物質(zhì)的溶出，而干擾物溶出產(chǎn)生的色譜峰過大，則會干擾實驗數(shù)據(jù)的分析與判斷。因此，強烈建議用戶優(yōu)先選擇對濾器或濾膜的UV吸收的干擾性物質(zhì)溶出進行過驗證的廠家，如ANOW(安諾)和pall。